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第四节 自身抗体检测（第1页）

抗核抗体（antinuclearantibody，ANA）

ANA是最常出现于自身免疫性风湿病（结缔组织病）患者血清中的一组自身抗体的总称。其靶抗原为真核细胞核成分，但也包括某些细胞质和细胞骨架成分，无种属特异性和器官特异性。

IIF法：正常人血清中ANA阴性（不同试剂盒判定阳性的滴度不同，有的为>1:40，有的定为>1:80，有的定为>l:100）。

ELISA法：定性试验阴性；

定量试验

1．测定ANA对很多自身免疫性疾病有诊断价值，在不同疾病中，特别是风湿性疾病，其抗体谱有一定的特征性。重要的有：全身性红斑狼疮（SLE）、药物诱导的狼疮、混合性结缔组织病（MCTD），ANA检出率可达95%~100%；干燥综合症为70%~80%，进行性全身硬化症（PSS）检出率可达85%~95%，其他如类风湿性关节炎、多发性肌炎及皮肌炎、慢性活动性肝炎、溃疡性结肠炎等也有20%~50%的检出率。此外，桥本甲状腺炎、重症肌无力、多发性动脉炎等患者也可检出ANA。

2．用荧光抗体法检测ANA时不同荧光图谱可见以下几点：

（l）均质型：此型与抗组蛋白抗体、抗DNA抗体及抗核小体抗体引起，几乎所有活动性SLE患者均可检出此型抗体，但多种其他自身免疫性疾病此抗体的检出率也可达20%~30%。

（2）周边型：此型抗体所针对的靶抗原是膜孔复合物和板层素。针对前者的抗体多见于SLE患者，针对后者的抗体可见于慢性自身免疫性肝炎的活动期。

（3）斑点型：与此型相关抗体有抗U1nRNP、抗Sm、抗scI70、抗SS-B、抗SS-A、抗Ki、抗Ku及抗其他非组蛋白抗体，多见于混合型结缔组织病（MCDT，也可见于SLE和60%以上的进行性全身性硬化（PPS）患者。

（4）核仁型：此型与核糖体、U3-RNP、RNA聚合酶的抗体有关，除SLE外，硬皮病患者阳性率可达40%。

（5）着丝粒型：抗着丝粒抗体对局限型全身性硬化症有很高的敏感性和特异性，阳性率可以达到80%~95%。

3．测定结果判断受主观因素影响较大，因此荧光染色图谱只有相对参考意义，不能据此作出定论，必要时应进一步作特异性ANA检测。

1．ELISA法影响因素较多，标本要防止溶血，因红细胞中含有过氧化物酶．红细胞裂解后造成标本溶血，过氧化物酶释放于血清中，与试剂中的辣根过氧化物酶作用相似，易造成假阳性。

2．要注意hook效应，即标本含量过高时，由于抗原一抗体比例不合适，易出现假阴性结果。

3．抗心律失常药物，如普鲁卡因胺、肼苯达嗪，异烟肼，苯妥英钠，保泰松等药物可引起假阳性。

4．洗涤次数要适当，防止洗涤不彻底致假阳性或洗涤过多致假阴性，要严格按照试剂盒说明书要求进行操作。

抗双链DNA抗体（anti-doublestrandedDNAantibody，an-ti-dsDNA）

抗DNA抗体可分为两种基本：抗双链DNA抗体或天然DNA和抗单链或变性DNA。

IIF法：正常人血清中抗dsDNA抗体滴度

RIA法：正常人血清中抗dsDNA抗体结合率≤0。20（20%）。

1．抗ds-DNA自身抗体是SLE最重要的标志性自身抗体。

2．抗ds-DNA抗体对SLE特异性很高，尤其当检测试剂中所用的ds-DNA不含单链或变性片段且阳性滴度较高时，对SLE特异性可达85%。RA患者阳性率最多为1%；干燥综合征、MCTD阳性率在10%以内。

3．高滴度抗ds-DNA抗体提示SLE处于活动期。此抗体直接与肾小球细胞内DNA结合或与循环中的DNA结合形成免疫复合物沉积于肾小球基底膜，故与狼疮性肾炎密切相关、特别是当血清补体C3、C4水平降低。

待测血清最好于采集当日检测。

抗ENA抗体（antibodiestoextractablenuclearantigen，ENA）

ENA为可提取性核抗原的简称，有三个组成部分：组蛋白、DNA、可溶性核抗原。现已发现有临床诊断价值的包括S（ss-B）、PM-1等10余种抗原，抗ENA抗体为其总称。

免疫印迹法：正常人血清中抗ENA抗体为阴性。

目前临床已将抗ENA抗体检测作为结缔组织病的重要诊断标准之一，蛋白质印迹法可同时检测数种多肽抗体，但与免疫电泳法比较其阳性率并无明显提高，因此ENA抗体阴性，不能排除某种风湿病的可能性。

1．抗Sm抗体主要见于SLE及其重叠综合征，有学者认为抗Sm抗体可作为SLE的标志性抗体，也有报告认为抗Sm抗体阳性的SLE患者，雷诺现象较多，可发生肾脏病变，预后不良，与其相反的观点是抗Sm抗体阳性与SLE活动期和肾脏损害无关，不能作为判断SLE及临床活动、好转和疗效的依据。

2．抗RNP抗体见于多种风湿病患者，SLE患者的阳性率30%~50%；PSS25%～30%；皮肌炎10%～20%；RA5%一10%，该抗体滴度通常较低。在混合性结缔组织病（MCTD）患者，阳性率为lOO%。因此，高滴度的抗RNP抗体被认为MCTD的诊断标志。抗RNP，但混合性结缔组织病患者阳性率可达95%~100%，且效价很高。抗RNP抗体阳性与肌炎、食管运动功能障碍、雷诺现象相关，但阳性患者多不发生肾炎。

3．抗SS-A和抗SS-B抗体为干燥综合征的标志性抗体。